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    層析冷柜廠家介紹什么是薄層層析

     發布時間:2016-01-04    點擊量:2307
         薄層層析是以涂布于支持板上的支持物作為固定相,以合適的溶劑為流動相,對混合樣品進行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多種物質的特別有效的層析方法。
     
      薄層層析是將吸附劑或者支持劑(有時加入固化劑)均勻地鋪在一塊玻璃上,形成薄層。把欲分離的樣品點在薄層上,然后用適宜的溶劑展開,使混合物得以分離的方法。
     
        薄層層析不僅可以用于純物質的鑒定,也可用于混合物的分離、提純及含量的測定。還可以通過薄層層析來摸索和確定柱層析時的洗脫條件。
     
        根據分離的原理不同,薄層層析可以分為兩類:用吸附劑鋪成的薄層所進行的層析為吸附薄層層析,吸附薄層中常用的吸附劑為氧化鋁和硅膠;用纖維素粉、硅膠、硅藻土為支持劑鋪成的薄層,屬于分配薄層層析。
        吸附TLC→固定相為吸附劑→氧化鋁、硅膠。(較多用)
    TLC→
        分配TLC→固定相為液態(通常為水)→固定相吸附在支持劑上。
     
    1、吸附薄層
     
    基本原理:吸附薄層主要是利用吸附劑對樣品中各成分吸附能力不同,及展開劑對它們的解吸附能力的不同,使各成分達到分離。
      
        吸附作用主要由于物體表面作用力、氫鍵、絡合、靜電引力、范德華力等產生。吸附強度決定于吸附劑的吸附能力,還受被吸附成分的性質影響,更與展開劑的性質有關。
    吸附薄層層析:在硅膠薄層板上,樣品中的兩成分是兩種結構近似的染料,在展開劑四氯化碳的作用下。在展開劑和薄層板之間不斷地產生吸附、解吸,再吸附,再解吸。由于對氨基偶氮苯的極性比偶氮苯的極性稍強一些,層析的結果,對氨基偶氮苯受到的吸附作用稍強于偶氮苯,從而將兩者分離。展開結束以后,會在薄層板上形成兩個斑點,混合物中的成分得以分離。
     
       特別是對未知結構的成分分析,設計并摸索出合理的層析條件是首要任務。只有先設計出可用的層析條件,再經摸索改進,才可能對未知或者已知成分進行成功地分離。然后才能談得上進一步的分析研究。
      薄層層析的三項基本構成物質是:樣品組分、吸附劑、展開劑。摸索層析條件,實際上是協調上述三者的關系,尋求一種能夠有效分離樣品組分的配合方案及實際操作要領。層析條件的選擇是以樣品中的各組分為中心,適當調適展開劑的吸附劑的極性來實現的。
     
    2、分配薄層層析
     
       用極性溶劑吸在固體支持劑上所形成的混合物,鋪成薄層(或裝柱),然后活化、點樣(或上樣),再用極性較弱的展開劑(或洗脫劑)進行展開。
     
    原理:在展開過程中,各成分在固定相和流動相之間作連續不斷的分配,由于各成分在兩相間的分配系數不同,因而可以達到相互分離的目的。
      
        以CS表示某成分在固定相中的濃度,Cm表示某成分在固定相中的濃度。則分配系數:K=CS/Cm。分配層析所用的固定相一般為水及各種水溶液(酸、堿、鹽與緩沖液)、甲酰胺、低級醇(親水性)等。分配層析所用的流動相選用與水不溶(或微溶)的有機溶劑。如石油醚、苯、鹵代烷類、脂類、酮類(如丁酮)、醇類(丁醇、戊醇)等或者它們的混合物。
      
        分配層析對混合物中各成分的分離,主要決定于各成分分配系數的差異,一般說來,對于種類成分均能適用,特別能適用于水溶性、親水性物質而又稍能溶于有機溶劑中者。這樣就恰好彌補了一般吸附層析(如氧化鋁吸附層析適用于親脂性物質)的不足。但是,由于分配柱層析樣品處理量較少,因此,如能用吸附柱層析解決問題時,常優先使用氧化鋁或硅膠吸附柱層析。

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